ミツバチ疾病診断キット

ミツバチ病気診断キットは、疑わしい幼虫や蜂の試料に特定の病原体がいるかどうかを、巣箱のそばで数分のうちに示す迅速検査用具です。最も一般的なのは、アメリカ腐蛆病とヨーロッパ腐蛆病に使われるイムノクロマト（ラテラルフロー）検査カセットです。判断を早めてはくれますが、確定診断にはなりません。陽性の結果は検査機関での確認が必要であり、届出が義務付けられた病気では公的機関への届出が必要です。

診断キットとは？どういう仕組み？

現場用診断キットの多くは、妊娠検査薬に似た原理で働くイムノクロマト検査（ラテラルフロー検査）（lateral flow device）です。カセット内のストリップには、目的の細菌に特有の構造を認識する抗体が含まれています。

1. 疑わしい幼虫を、キット付属の緩衝液の中でつぶして振り混ぜます。
2. 液を数滴、カセットの試料窓に滴下します。
3. 液はストリップに沿って流れ、病原体がいれば抗体に結合してテストライン（T）が発色します。
4. コントロールライン（C）は有効な検査なら必ず現れ、検査が正しく働いたことを示します。

結果はたいてい数分で読めます。コントロールラインがまったく現れなければ検査は無効で、新しいカセットでやり直す必要があります。

どんなミツバチの病気に診断キットがある？

腐蛆病キットの使い方（手順）

1. 正しい幼虫を選ぶ：症状が最もはっきりした、死んだばかりか死にかけている幼虫を取ります。健康に見える巣房から取った試料は偽陰性になります。乾いた古いかさぶた（スケール）は必ずしも適した試料ではないので、キットの説明書を確認してください。
2. 試料をチューブに移す：付属の棒か清潔なマッチ棒で幼虫を緩衝液に入れます。
3. 振り混ぜる：説明書に書かれた時間、チューブを強く振ります。幼虫が液中にばらばらになるようにします。
4. 滴下する：数滴をカセットの試料窓に落とし、カセットを平らな面に置きます。
5. 待って読む：説明書に書かれた時間で読み取ります。遅すぎる読み取りは誤解を招くことがあります。
6. 記録して届け出る：カセットの写真を撮り、日付と巣箱番号を書きます。陽性なら巣箱を隔離し、家畜保健衛生所に届け出ます。

診断キットの限界

• 確定診断ではない：公的な手続きや補償などには検査機関の結果が必要です。
• 偽陰性があり得る：誤った幼虫を選んだとき、病気がごく初期のとき、試料が少ないときは病原体を検出できないことがあります。
• 陰性は安心の保証ではない：症状が続くなら試料を検査機関に送るべきです。
• 1つの病気しか調べない：EFBキットはAFBを、AFBキットはEFBを示しません。2つの病気が同じ巣箱に同時にいることもあります。
• 保管条件：キットは使用期限と保管温度の影響を受けます。日なたに置いたり凍らせたりしたキットは信頼できません。

ノゼマ病の診断：顕微鏡セット

ノゼマには一般に使われる迅速カセットはなく、診断は顕微鏡で行います。養蜂家が自分でノゼマ診断セットをそろえることは可能です。400倍の倍率が出せる光学顕微鏡、スライドガラスとカバーガラス、小さな乳鉢やチューブ、スポイト、必要なら胞子計数盤です。年をとった外勤蜂から約30匹を取り、腹部を少量の水でつぶして、縁が光る楕円形の胞子を探します。2種類のノゼマを区別するには検査機関での分子検査が必要です。

検査機関での診断と試料の送付

確定診断、種の識別、ウイルスの検出、残留分析は検査機関の仕事です。検査機関では培養、顕微鏡検査、PCRなどの分子的手法を使います。試料を送るときは次の点に注意しましょう。

• 蜂児の病気の場合は、症状のある蜂児を含む巣板の一部（蜜を含まないもの）を清潔な段ボール箱に入れるか紙で包んで送ります。ビニール袋は腐敗を早めます。
• 成蜂の検査には通常30匹ほどで足ります。検査機関が求める数と保管方法を事前に問い合わせてください。
• 巣箱の底のくずは、一部の害虫の監視に使われます。担当者の指示に従って集めます。
• 各試料に日付、場所、巣箱番号、観察した内容を書き添えます。

届出義務のある病気では、通常は公的な獣医師が試料を採取します。その場合は自分で試料を送って結果を待つのではなく、まず届け出てください。

診断キットを選ぶときのポイントは？

• どの病気か：キットが正確にどの病原体を調べ、どんな試料（幼虫、成蜂）で使えるかを確認します。
• 承認と書類：自国で診断用として使用が認められ、説明書が自国語で書かれているか、わかりやすいキットを選びましょう。
• 使用期限と保管：期限の短いキットは必要な分だけ買います。
• 確認の手段：陽性のカセットをどう検査機関に送り、どこに届け出るかがはっきりしている必要があります。
• 期待しすぎない：どんなに良いキットでも、定期的な蜂児の点検やマッチ棒テストの代わりにはなりません。