Диагностические наборы болезней пчел

Наборы для диагностики болезней пчёл — это экспресс-тесты, которые прямо у улья за несколько минут показывают, присутствует ли определённый возбудитель в подозрительной личинке или пробе пчёл. Наиболее распространены иммунохроматографические (lateral flow) тест-кассеты для американского и европейского гнильца. Они ускоряют принятие решения, но не ставят окончательный диагноз: положительный результат требует лабораторного подтверждения, а при болезнях, подлежащих обязательному уведомлению, — официального сообщения.

Что такое диагностический набор и как он работает?

Большинство полевых диагностических наборов — это иммунохроматографические тесты (lateral flow device), работающие по принципу, схожему с тестами на беременность. На полоске внутри кассеты нанесены антитела, распознающие структуры, характерные для искомой бактерии:

1. Подозрительную личинку раздавливают и взбалтывают в буферной жидкости из набора.
2. Несколько капель жидкости наносят в окно для образца на кассете.
3. Жидкость продвигается по полоске; если возбудитель присутствует, он связывается с антителами, и тестовая линия (T) окрашивается.
4. Контрольная линия (C) появляется при каждом действительном тесте; она показывает, что тест сработал правильно.

Результат обычно считывают через несколько минут. Если контрольная линия не появилась вовсе, тест недействителен и его нужно повторить с новой кассетой.

Для каких болезней пчёл существуют диагностические наборы?

Как пошагово использовать набор на гнилец?

1. Выберите правильную личинку: Возьмите личинку с наиболее выраженными симптомами, недавно погибшую или погибающую. Проба из здоровой на вид ячейки даст ложноотрицательный результат. Засохшие старые корочки не всегда подходят в качестве образца; сверьтесь с инструкцией набора.
2. Перенесите образец в пробирку: Палочкой из набора или чистой спичкой поместите личинку в буферную жидкость.
3. Взболтайте: Энергично встряхивайте пробирку в течение указанного в инструкции времени; личинка должна распасться в жидкости.
4. Нанесите капли: Нанесите несколько капель в окно для образца на кассете и положите кассету на ровную поверхность.
5. Подождите и считайте: Считайте результат в указанное в инструкции время; слишком поздно считанный результат может ввести в заблуждение.
6. Запишите и сообщите: Сфотографируйте кассету; запишите дату и номер улья. При положительном результате изолируйте улей и сообщите в государственную ветеринарную службу.

Ограничения диагностических наборов

• Это не окончательный диагноз: Для официальных процедур, например для получения компенсации, нужен лабораторный результат.
• Возможен ложноотрицательный результат: При неправильном выборе личинки, на очень ранней стадии болезни или при малом количестве образца возбудитель может быть не обнаружен.
• Отрицательный результат — не гарантия: Если симптомы сохраняются, образец нужно отправить в лабораторию.
• Ищет одну болезнь: Набор на ЕГ не выявляет АГ, а набор на АГ — ЕГ; обе болезни могут одновременно присутствовать в одном улье.
• Условия хранения: Наборы чувствительны к сроку годности и температуре хранения; набор, побывавший на солнце или на морозе, ненадёжен.

Диагностика нозематоза: набор для микроскопии

Распространённых экспресс-кассет для нозематоза нет; диагноз ставят с помощью микроскопа. Пчеловод вполне может собрать собственный набор для диагностики нозематоза: световой микроскоп с увеличением в 400 раз, предметные и покровные стёкла, небольшая ступка или пробирка, пипетка, при необходимости — камера для подсчёта спор. Брюшки примерно 30 старых пчёл-сборщиц растирают с небольшим количеством воды и ищут овальные споры с блестящим краем. Для различения двух видов ноземы нужен молекулярный тест в лаборатории.

Лабораторная диагностика и отправка образцов

Окончательный диагноз, определение вида, выявление вирусов и анализ на остатки — это работа лаборатории. Лаборатории используют посев, микроскопию и молекулярные методы, например ПЦР. При отправке образцов:

• При болезни расплода отправляйте кусок сота с поражённым расплодом (без мёда), упаковав его в чистую картонную коробку или бумагу; полиэтиленовый пакет ускоряет гниение.
• Для исследования взрослых пчёл обычно достаточно около 30 пчёл; заранее уточните в лаборатории нужное количество и способ хранения.
• Осыпь со дна улья используют для надзора за некоторыми вредителями; её собирают по указанию уполномоченного специалиста.
• На каждом образце укажите дату, место, номер улья и свои наблюдения.

При болезнях, подлежащих обязательному уведомлению, образец обычно отбирает официальный ветеринарный врач; в этом случае не отправляйте образец сами в ожидании результата, а сначала сообщите о подозрении.

На что обращать внимание при выборе диагностического набора?

• Какая болезнь: Проверьте, какой именно возбудитель ищет набор и с каким образцом (личинка, взрослая пчела) он работает.
• Регистрация и документы: Отдавайте предпочтение наборам, разрешённым для диагностического применения в вашей стране, с инструкцией на русском или другом понятном вам языке.
• Срок годности и хранение: Наборы с коротким сроком годности покупайте в нужном количестве.
• Путь подтверждения: Должно быть понятно, как отправить положительную кассету в лабораторию и кому сообщить.
• Ожидания: Каким бы хорошим ни был набор, он не заменяет регулярный осмотр расплода и спичечную пробу.