Diagnosekits voor bijenziekten

Diagnosekits voor bijenziekten zijn sneltests die bij de kast binnen enkele minuten laten zien of een bepaalde ziekteverwekker aanwezig is in een verdachte larve of een verdacht bijenmonster. De bekendste zijn de laterale-flowcassettes voor Amerikaans en Europees vuilbroed. Ze versnellen de beslissing, maar geven geen definitieve diagnose: een positieve uitslag vereist bevestiging door een laboratorium en, bij aangifteplichtige ziekten, een officiële melding.

Wat is een diagnosekit en hoe werkt hij?

De meeste veldtests zijn laterale-flowtests (lateral flow device) die volgens een vergelijkbaar principe werken als zwangerschapstests. Op de strip in de cassette zitten antistoffen die structuren herkennen die specifiek zijn voor de gezochte bacterie:

1. De verdachte larve wordt in de meegeleverde buffervloeistof fijngedrukt en geschud.
2. Een paar druppels vloeistof worden in het monstervenster van de cassette gedruppeld.
3. De vloeistof trekt langs de strip; is de ziekteverwekker aanwezig, dan bindt die aan de antistoffen en kleurt de testlijn (T).
4. De controlelijn (C) verschijnt bij elke geldige test; hij laat zien dat de test goed werkt.

De uitslag is meestal binnen een paar minuten af te lezen. Verschijnt de controlelijn helemaal niet, dan is de test ongeldig en moet hij met een nieuwe cassette worden herhaald.

Voor welke bijenziekten bestaan diagnosekits?

Hoe gebruik je een vuilbroedtest stap voor stap?

1. Kies de juiste larve: Neem de larve met de duidelijkste symptomen, die pas gestorven of stervende is. Een monster uit een gezond ogende cel geeft een vals-negatieve uitslag. Oude, ingedroogde schubben zijn niet altijd een geschikt monster; kijk in de handleiding van de kit.
2. Breng het monster in het buisje: Neem de larve met het meegeleverde staafje of een schone lucifer op in de buffervloeistof.
3. Schud: Schud het buisje krachtig zo lang als in de handleiding staat; de larve moet in de vloeistof verdeeld raken.
4. Druppel: Druppel een paar druppels in het monstervenster van de cassette en leg de cassette op een vlakke ondergrond.
5. Wacht en lees af: Lees af na de tijd die in de handleiding staat; een te laat afgelezen uitslag kan misleiden.
6. Noteer en meld: Maak een foto van de cassette en noteer datum en kastnummer. Bij een positieve uitslag isoleer je de kast en meld je het bij de officiële veterinaire dienst.

Beperkingen van diagnosekits

• Geen definitieve diagnose: Voor officiële procedures en bijvoorbeeld schadevergoeding is een laboratoriumuitslag nodig.
• Vals-negatief is mogelijk: Bij een verkeerd gekozen larve, een zeer vroeg ziektestadium of te weinig monstermateriaal wordt de ziekteverwekker mogelijk niet gevonden.
• Een negatieve uitslag is geen garantie: Houden de symptomen aan, stuur dan een monster naar het laboratorium.
• Zoekt naar één ziekte: Een EVB-test toont geen AVB en een AVB-test geen EVB; beide ziekten kunnen samen in dezelfde kast voorkomen.
• Bewaarcondities: Kits zijn gevoelig voor houdbaarheidsdatum en bewaartemperatuur; een kit die in de zon of in de vorst heeft gelegen, is niet betrouwbaar.

Diagnose van nosema: de microscoopset

Voor nosema bestaat geen gangbare snelle cassette; de diagnose wordt met de microscoop gesteld. Een imker kan zelf een nosemaset samenstellen: een lichtmicroscoop die 400 keer kan vergroten, objectglaasjes en dekglaasjes, een vijzeltje of buisje, een pipet en eventueel een telkamer voor sporen. Van ongeveer 30 oude haalbijen worden de achterlijven met een beetje water fijngewreven; er wordt gezocht naar ovale sporen met een glanzende rand. Om de twee nosemasoorten van elkaar te onderscheiden is een moleculaire test in het laboratorium nodig.

Laboratoriumdiagnose en monsters opsturen

Definitieve diagnose, onderscheid tussen soorten, opsporing van virussen en residuanalyse zijn laboratoriumwerk. Laboratoria gebruiken kweek, microscopie en moleculaire methoden zoals PCR. Bij het opsturen van monsters:

• Stuur bij broedziekten een stuk raat met aangetast broed (zonder honing), verpakt in een schone kartonnen doos of in papier; een plastic zak versnelt het rotten.
• Voor onderzoek van volwassen bijen zijn meestal zo'n 30 bijen genoeg; vraag vooraf welk aantal en welke bewaarwijze het laboratorium wil.
• Afval van de kastbodem wordt gebruikt bij het monitoren van sommige plagen; het wordt verzameld volgens de aanwijzingen van de bevoegde instantie.
• Vermeld bij elk monster datum, plaats, kastnummer en je waarnemingen.

Bij aangifteplichtige ziekten neemt meestal de officiële dierenarts het monster; stuur in dat geval niet zelf een monster op om dan af te wachten, maar meld het eerst.

Waar let je op bij het kiezen van een diagnosekit?

• Welke ziekte: Controleer naar welke ziekteverwekker de kit precies zoekt en met welk monster (larve, volwassen bij) hij werkt.
• Toelating en documenten: Kies kits die in jouw land voor diagnostisch gebruik zijn toegestaan en waarvan de handleiding in je eigen taal of anderszins begrijpelijk is.
• Houdbaarheid en bewaring: Koop kits met een korte houdbaarheid niet meer dan nodig.
• Weg voor bevestiging: Het moet duidelijk zijn hoe een positieve cassette naar het laboratorium wordt gestuurd en bij wie je het meldt.
• Verwachting: Hoe goed een kit ook is, hij vervangt geen regelmatige broedcontrole en luciferproef.