Microscopes pour insemination

Le microscope d'insémination artificielle est un microscope stéréoscopique à faible grossissement, offrant une perception du relief grâce à la vision binoculaire, utilisé pour l'insémination instrumentale des reines (insémination artificielle) ; c'est sous ce microscope que l'on récolte le sperme des faux bourdons et que l'on place l'embout de la seringue dans les voies génitales de la reine. L'instrument de travail n'est pas le microscope de laboratoire à fort grossissement servant à examiner les spermatozoïdes, mais le microscope stéréoscopique à grande distance de travail et à lumière froide. Cette page présente le rôle du microscope, ses caractéristiques techniques, les critères de choix, son installation avec l'appareil d'insémination et son entretien.

À quoi sert le microscope en insémination artificielle ?

Lors de l'insémination instrumentale, la reine vierge est anesthésiée au dioxyde de carbone puis placée dans un tube de contention. L'opérateur ouvre la chambre de l'aiguillon à l'aide de petits crochets, dont l'un saisit l'aiguillon, contourne le repli situé à l'entrée des voies génitales (valvula), fait progresser l'embout de la seringue dans l'oviducte et dépose le sperme. Ces structures mesurant moins d'un millimètre, l'intervention est impossible à l'œil nu.

Le microscope a deux fonctions :

• Récolte du sperme : le sperme de couleur crème, situé à l'extrémité de l'endophallus évaginé du faux bourdon, est aspiré dans l'embout de la seringue en le séparant du mucus ; distinguer le sperme du mucus blanc nécessite un grossissement.
• Insémination : la mise en place des crochets, le passage de la valvula et la progression de l'embout de la seringue jusqu'à la bonne profondeur se suivent au microscope.

Mesurer le nombre ou la viabilité des spermatozoïdes du sperme est une autre affaire ; cela se fait dans les laboratoires de recherche, au microscope optique à fort grossissement et avec des méthodes de coloration. Sur le terrain et dans les stations de sélection, seul le microscope stéréoscopique est nécessaire à l'insémination.

Quelles sont les caractéristiques d'un microscope d'insémination ?

Comment choisir un microscope ?

• Zoom ou grossissement fixe : un stéréomicroscope à zoom permet de passer facilement à une vue plus large pour la récolte du sperme et plus rapprochée pour l'insémination. Les modèles à grossissement fixe sont plus simples et plus robustes ; un grossissement d'environ 10 fois suffit pour la plupart des tâches.
• Qualité optique : une image nette jusqu'aux bords et identique pour les deux yeux réduit la fatigue oculaire lors des longues séances. Le réglage de l'écart interpupillaire et de la dioptrie doit être possible.
• Éclairage : une fibre flexible à deux bras ou un éclairage annulaire LED assure un éclairage sans ombre. L'intensité lumineuse doit être réglable.
• Compatibilité avec l'appareil : le statif du microscope doit convenir au socle et à la hauteur de l'appareil d'insémination que vous utiliserez ; certains appareils sont conçus pour se poser sur le socle du microscope.
• Ergonomie : des tubes oculaires inclinés et une hauteur de travail adaptée réduisent la fatigue du cou et du dos lors des journées d'insémination où l'on traite de nombreuses reines.
• Transportabilité : l'insémination se fait souvent dans une pièce temporaire proche du rucher ; une mallette de transport solide et une installation facile sont importantes.

Comment installer le microscope et l'appareil d'insémination ?

1. Table : une table stable, sans vibrations et assez grande ; de la place sur le côté pour les cages à reine, la boîte à faux bourdons et la bouteille de dioxyde de carbone.
2. Appareil : l'appareil d'insémination est placé sous le microscope de sorte que le porte-reine se trouve au centre du champ de vision.
3. Dioxyde de carbone : la bouteille est raccordée au porte-reine par un dispositif avec détendeur et réglage de débit ; le flux de gaz doit être très faible.
4. Mise au point et éclairage : on règle la mise au point et la lumière sur un porte-reine vide ; on vérifie les crochets et l'embout de la seringue dans le champ de vision.
5. Seringue : la seringue, propre et remplie de solution saline stérile sans bulles d'air, est montée sur l'appareil.

Les autres équipements du laboratoire d'insémination

• Appareil d'insémination : un dispositif métallique à réglage fin par vis, composé du porte-reine, du crochet de l'aiguillon, du crochet ventral (ou d'un écarteur de type pince) et du porte-seringue.
• Seringue et embouts : une seringue de précision qui aspire et injecte le sperme ; de fins embouts en verre ou en plastique.
• Système de dioxyde de carbone : bouteille, détendeur, réglage de débit et petit flacon d'eau pour humidifier le gaz.
• Solution saline et matériel de nettoyage : sérum physiologique stérile, alcool, cotons-tiges.
• Cages et armoire de maintien : les cages où l'on garde les reines avant et après l'intervention, et une armoire de maintien chauffée.

Entretien et nettoyage

• Nettoyage optique : les lentilles ne s'essuient qu'avec du papier pour optique et une solution adaptée ; la cire, la propolis et les traces de doigts altèrent l'optique.
• Protection contre la poussière : hors utilisation, le microscope est couvert d'une housse et rangé dans un endroit sec.
• Hygiène de l'appareil : les crochets et l'embout de la seringue sont nettoyés après chaque reine ; les règles d'hygiène sont appliquées intégralement pour éviter la transmission de maladies.
• Source lumineuse : si l'on utilise une lampe halogène, on surveille l'échauffement ; on préfère une lumière froide LED ou à fibre.
• Transport : le microscope est transporté dans sa mallette, à l'abri des chocs ; on ne force pas les mécanismes de mise au point et de zoom.

Erreurs fréquentes

• Grossissement excessif : la profondeur de champ diminue, les crochets et l'embout de la seringue ne peuvent plus être nets en même temps.
• Lumière chaude : la reine et le sperme se dessèchent ou chauffent.
• Distance de travail trop courte : les bras de l'appareil et les mains n'ont pas assez de place, les gestes sont gênés.
• Croire que le microscope suffit : un bon microscope facilite l'insémination mais ne l'enseigne pas ; le savoir-faire s'acquiert par la formation et la pratique.